ในปี 2544 บุฟฟ่อนเซ็นสัญญากับยูเวนตุสด้วยค่าตัวสถิติโลกในตอนนั้นสำหรับผู้รักษาประตู ที่ 52 ล้านยูโร เขาใช้เวลาอีก 17 ปีข้างหน้ากับยูเวนตุส กลายเป็นเจ้าของสถิติการลงเล่นมากที่สุดตลอดกาลให้สโมสร ด้วยการลงเล่นมากกว่า 650 นัดในทุกรายการ ในช่วงเวลาที่เขาอยู่กับยูเวนตุส บุฟฟ่อนคว้าแชมป์เซเรีย อา 9 สมัย แชมป์โคปปา อิตาเลีย 4 สมัย และเข้าถึงรอบชิงชนะเลิศยูฟ่าแชมเปียนส์ลีก 3 ครั้ง โดยชนะการแข่งขันในปี 2549